Passi speċifiċi għall-estrazzjoni tal-klorofilla permezz tal-frammentazzjoni taċ-ċelluli bl-użu ta 'crusher taċ-ċelluli ultrasoniku

Il-crusher taċ-ċelluli ultrasoniku juża l-effett ta 'dispersjoni tal-ultrasound fil-likwidu biex joħloq cavitation, u b'hekk jikser partiċelli solidi jew tessuti taċ-ċelluli fil-likwidu.
L-iżvilupp tal-industrija bijoloġika għolla r-rekwiżiti għal esperimenti bl-użu ta 'pulverizers taċ-ċelluli ultrasoniċi, bħall-kejl u l-kontroll tat-temperatura tal-kampjun, it-titjib tal-livell ta' intelliġenza ta 'kampjuni li jkessħu b'temperatura baxxa u l-magna kollha, eċċ.
Il-passi speċifiċi għall-estrazzjoni tal-klorofilla permezz tat-tgħaffiġ taċ-ċelluli ultrasoniku bl-użu ta 'crusher taċ-ċelluli ultrasoniku:
1. Iċċentrifuga jew iffiltra l-kampjun tal-ilma u installa membrana tal-filtru tal-fibra tal-aċetat fuq il-filtru tal-ġbid. Ferra volum kwantitattiv ta 'kampjun ta' ilma għall-filtrazzjoni, u l-pressjoni negattiva waqt il-filtrazzjoni m'għandhiex tkun għolja wisq (madwar 50kPa). Wara li jinġibed il-kampjun tal-ilma, kompli iġbed għal 1-2 minuti biex tnaqqas l-umdità fuq il-membrana tal-filtru. Jekk tkun meħtieġa ħażna għal żmien qasir għal 1-2 ijiem, tista' tinħażen fi friġġ regolari għall-iffriżar. Jekk tkun meħtieġa ħażna fit-tul (30 jum), għandha tinħażen fi friġġ b'temperatura baxxa (-20 grad ).
2. Oħroġ il-membrana tal-filtru li fiha l-fitoplankton u nixxefha f'temperatura baxxa fil-friġġ għal 6-8 sigħat. Aqtagħha f’biċċiet żgħar bl-imqass u poġġiha f’tubu ċentrifugu ta’ 5ml jew 10ml. Żid 3-4 ml ta' 90% aċetun biex tgħaddas il-frammenti taħt il-livell tal-likwidu. Poġġi l-frammenti f'kontenitur ultrasoniku u uża mewġ ultrasoniku biex tkisser iċ-ċelloli tal-kampjun. (Tqabbil ta 'esperimenti f'ħinijiet u frekwenzi differenti biex tiffaċilita l-identifikazzjoni ta' * ħin ta 'frammentazzjoni u frekwenza għal metodi unifikati).
3. Iċċentrifuga l-kampjun soġġett għall-frammentazzjoni taċ-ċelluli bl-użu ta' ultrasound billi tuża ċentrifuga (3000-4000r/min) għal 10 minuti. Ferra s-supernatant f'kunjett volumetriku ta' 5ml jew 10ml. Iddilwa għal 5ml jew 10ml b'90% aċetun u ħawwad sew.
4. Poġġi s-supernatant fuq spettrofotometru u uża dixx kolorimetriku ta 'passaġġ ottiku ta' 1cm biex taqra l-valuri ta 'assorbiment f'wavelengths ta' 750nm, 663nm, 645nm, u 630nm, rispettivament. Uża 90% aċetun bħala kejl tal-assorbiment vojt biex tikkoreġi l-assorbiment tal-kampjun.